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病毒采样管内灭活与非灭活病毒保存液的区别

2021-09-24 00:00:00

病毒采样管一般分两种型号:一种是非灭活型病毒采样管,其内的非灭活保存液能够保护病毒的蛋白和核酸;另一种是灭活型病毒采样管,其内的灭活保存液通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸,两者有着各自不同的特点,有着不同的应用方向。

灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,里面添加有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止操作员二次感染,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否感染病毒。灭活型保存液能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。

灭活型病毒保存液产品的特点:1.操作使用简单,无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次感染风险,保障运输及检测人员安全;⒉病毒DNA/RNA可在常温保存与运输1周不降解,按大多数商业化试剂盒进行提取后,获得的DNA/RNA质量好,得率高,可完成各种基因检测及分析实验,如PCR、qPCR等,同时节省运输成本;3.内含核RNA酶抑制剂,可以保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率;4.适用于新冠病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,可采集咽拭子鼻试子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床试验。

非灭活型病毒保存液不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液,除了核酸检测外还可以用于其他研究。这一种是同时保留了病毒的蛋白质外壳以及病毒核酿DNA或者RNA,这样病毒在体外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,当然操作失误时也有一定的感染性风险。其成分通常含有Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA(V) ,冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等,保护病毒蛋白质外壳不易分解,尽可能地保持了病毒样本的原始性,采样后长时间保存需要保持严格低温。

非灭活型病毒保存液特点:1.低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输;⒉.适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子等;3.可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒;4.可以用柱式病毒DNAout或柱式病毒RNAout提取病毒核酸;5.采样液中的抗生素能有效防止细菌和真菌污染;6.采样液添加了牛血清白蛋白,能保护病毒样本,提高分离率。

从两者比较可以看出,非灭活型设计的目的就是为了保留病毒蛋白完整性,其成分比灭活型的更复杂,成本也要稍高一些。至于增加了感染风险方面其实并不用担心,能做病毒核酸检测的机构只要是正规的按要求操作是没有危险的,而且也没出现过检测人员因病毒保存液问题造成病毒感染的案例。非灭活型病毒保存液对实验要求要更高一些,同时其灵敏度也要高一些,应用也更多,毕竟保存液加在病毒拭子采样管里是为了病毒检测服务的,不能因其感染性就否定它,真正控制风险应该在于采样和检测操作上。

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